標(biāo)題:石蠟包埋人體組織str檢驗(yàn)的探討

  【摘要l目的探討普通甲醛對(duì)人體組織dna的影響及提高str檢出率的手段。方法取少量石蠟包埋組織,65℃水浴脫蠟,
  chelex一100法提取dna,pcr擴(kuò)增,循環(huán)次數(shù)分別為28次和28+6次,擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)310型測(cè)序檢測(cè)。結(jié)果普通甲醛固定5 d以內(nèi)的
  組織基本上可檢出amel及15個(gè)str基因座。固定時(shí)間延長,檢出率下降;pcr循環(huán)次數(shù)增 ……(快文網(wǎng)http://hoachina.com省略303字,正式會(huì)員可完整閱讀)…… 
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  的組織中dna降解相對(duì)嚴(yán)重,提取高質(zhì)量的dna并
  進(jìn)行pcr—str分型較為困難。實(shí)踐中人體組織固定
  時(shí)間長短不一,但以1周左右多見。本文的目的是探
  索普通10%甲醛固定時(shí)間對(duì)pcr—str分型的影響以
  及提高檢出率的適當(dāng)方法。
  材料與方法
  一
  、材料
  石蠟包埋人體組織均取自本所病理室。5個(gè)無關(guān)
  個(gè)體的心、腎組織用1o%普通甲醛固定5 d、8 d、12 d
  和15 d以上時(shí).剪取組織邊緣甲醛完全浸潤處。石蠟
  包埋,常規(guī)切片he染色,顯微鏡下觀察確保組織結(jié)構(gòu)
  清晰,無自溶、壞死和大片出血后,作為本研究材料使
  用。
  二、方法
  1.預(yù)處理。切取8 ixm厚的石蠟包埋組織,盡量剔
  除石蠟部分,放入0.5 ml離心管中;或挖取小米粒大
  的石蠟包埋組織,放入0.5 ml離心管中。加入500
  ddw,65c【=保溫10min脫蠟,棄除液體! 】
  2.dna的提取。向每個(gè)離心管中加入150 ixl的
  5%chelex一100和8 l pk (20mg/m1),56 c【=保溫過夜,
  次日再加4 lpk(20mg/m1),再消化4h,振蕩后,100cc
  8rain,13000 rpm/min離心3rain,4 oc備用。
  3.pcr擴(kuò)增。采用identifiler熒光復(fù) ……(未完,全文共3271字,當(dāng)前只顯示787字,請(qǐng)閱讀下面提示信息。收藏石蠟包埋人體組織str檢驗(yàn)的探討

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