標(biāo)題:石蠟包埋人體組織str檢驗(yàn)的探討 | ||
【摘要l目的探討普通甲醛對(duì)人體組織dna的影響及提高str檢出率的手段。方法取少量石蠟包埋組織,65℃水浴脫蠟, chelex一100法提取dna,pcr擴(kuò)增,循環(huán)次數(shù)分別為28次和28+6次,擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)310型測(cè)序檢測(cè)。結(jié)果普通甲醛固定5 d以內(nèi)的 組織基本上可檢出amel及15個(gè)str基因座。固定時(shí)間延長,檢出率下降;pcr循環(huán)次數(shù)增 ……(快文網(wǎng)http://hoachina.com省略303字,正式會(huì)員可完整閱讀)……
進(jìn)行pcr—str分型較為困難。實(shí)踐中人體組織固定 時(shí)間長短不一,但以1周左右多見。本文的目的是探 索普通10%甲醛固定時(shí)間對(duì)pcr—str分型的影響以 及提高檢出率的適當(dāng)方法。 材料與方法 一 、材料 石蠟包埋人體組織均取自本所病理室。5個(gè)無關(guān) 個(gè)體的心、腎組織用1o%普通甲醛固定5 d、8 d、12 d 和15 d以上時(shí).剪取組織邊緣甲醛完全浸潤處。石蠟 包埋,常規(guī)切片he染色,顯微鏡下觀察確保組織結(jié)構(gòu) 清晰,無自溶、壞死和大片出血后,作為本研究材料使 用。 二、方法 1.預(yù)處理。切取8 ixm厚的石蠟包埋組織,盡量剔 除石蠟部分,放入0.5 ml離心管中;或挖取小米粒大 的石蠟包埋組織,放入0.5 ml離心管中。加入500 ddw,65c【=保溫10min脫蠟,棄除液體! 】 2.dna的提取。向每個(gè)離心管中加入150 ixl的 5%chelex一100和8 l pk (20mg/m1),56 c【=保溫過夜, 次日再加4 lpk(20mg/m1),再消化4h,振蕩后,100cc 8rain,13000 rpm/min離心3rain,4 oc備用。 3.pcr擴(kuò)增。采用identifiler熒光復(fù) ……(未完,全文共3271字,當(dāng)前只顯示787字,請(qǐng)閱讀下面提示信息。收藏石蠟包埋人體組織str檢驗(yàn)的探討) 上一篇:靜滴莪術(shù)油注射液過敏致死的法醫(yī)學(xué)鑒定(附2例報(bào)告) 下一篇:急性醉酒所涉及的法律問題 相關(guān)欄目:共青團(tuán) 組工 組織講話 黨會(huì)報(bào)告 七一黨建專題 綜合論文 |