標題:兔巴氏桿菌-波氏桿菌二聯(lián)蜂膠疫苗的研制及安全、效力試驗

  兔巴氏桿菌-波氏桿菌二聯(lián)蜂膠疫苗的
  研制及安全、效力試驗
  兔多殺性巴氏桿菌病(pm)和兔支氣管敗血波氏桿菌病(bb)是家兔的兩種主要細菌性傳染病,它們傳播迅速,一旦在兔場暴發(fā)流行,很難根除,經(jīng)濟損失慘重。進行疫苗接種是預(yù)防這兩種疾病的最有效的措施。免疫原性好的菌(毒)種和良好的免疫佐劑是保證疫苗免疫效力的必要條件。因此,在pm和bb基礎(chǔ)菌種研究的基礎(chǔ)上,對蜂膠的提取工藝進行了研究,選取了 ……(快文網(wǎng)http://hoachina.com省略344字,正式會員可完整閱讀)…… 
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  1.2 試驗方法
  1.2.1 pm90菌液的制備及檢驗
  1.2.1.1一級種子的繁殖與鑒定 用滅菌生理鹽水適當稀釋pm90株第9代凍干菌種,接種于0.1%綿羊血紅素的馬丁瓊脂平板(bms)上,37℃培養(yǎng)18h,然后選取5-10個典型菌落,分別接種于10%綿羊鮮血瓊脂斜面若干,同上培養(yǎng)后,作為一級種子。在4℃保存,可使用7日。繼代次數(shù)不超過3代。
  1.2.1.2二級種子的繁殖及鑒定 將pm90株一級種子接種于適量馬丁肉湯中,置37℃振蕩培養(yǎng)18h,取樣用sms培養(yǎng)基作純粹檢驗;置4℃保存,可使用3日。
  1.2.1.3制苗用菌液的培養(yǎng) 將pm90株二級種子接種于sms培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)18h,無菌水洗下菌苔,取樣做純粹檢驗,同時用平板菌落計數(shù)法計算菌液濃度,將菌液濃度調(diào)整為200×108個/ml。
  1.2.1.4菌液的滅活 加入0.4%的甲醛溶液于菌液中,容器密封后,37℃滅活48h,其間振搖6-8次,然后進行滅活檢驗。本研究滅活檢驗及無菌檢驗用的培養(yǎng)基為:sms、t.g、g.a和g.p。置37℃條件下培養(yǎng)48h,無細菌生長說明已完全滅活。
  1.2.1.5菌液的離心、凍融 滅活檢驗合格的菌液用管式分離機離心除去甲醛,無菌刮下菌苔,用等量的滅菌生理鹽水配成原濃度的菌液。小量分裝后反復(fù)凍融3次,再次進行無菌檢驗。
  1.2.2 bb82菌液的制備與檢驗 將bb82株第7代凍干菌種接種于bms培養(yǎng)基上,37℃條件下培養(yǎng)24h,然后選5-10個典型菌落,分別接種于10%綿羊鮮血瓊脂斜面若干 ……(未完,全文共3715字,當前只顯示894字,請閱讀下面提示信息。收藏兔巴氏桿菌-波氏桿菌二聯(lián)蜂膠疫苗的研制及安全、效力試驗

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