標(biāo)題：β-甘露聚糖酶產(chǎn)生菌的篩選和酶學(xué)性質(zhì)探討

摘 要：從土壤中分離篩選出5株產(chǎn)胞外β-甘露聚糖酶的菌株，其中dk3菌株的搖瓶培養(yǎng)液的酶活力達(dá)3.85 u /ml。該酶水解葡甘露聚糖的最適溫度為37℃，最適ph為6.0，ph穩(wěn)定范圍為5.0~9.0 ，在低于40℃的溫度下基本穩(wěn)定。fe 2+ 、cu2+、edta和nh4+ 對(duì)該酶有抑制作用，na+ 則有激活作用。 　　關(guān)鍵詞： β-甘露聚糖酶；篩選；酶學(xué)性質(zhì) 　　β-1,4-d-甘露聚糖酶(β-1,4-d-mannan mannanohydrolase，ec.3.2. l. 78)是一類(lèi)能水解含有β-1,4-d-甘露糖為主鏈的多糖(包括甘露聚糖、半乳甘露聚糖、葡甘聚糖等)的內(nèi)切酶[1]。該酶用途廣泛，能分解魔芋葡甘露聚糖，　……（快文網(wǎng)http://hoachina.com省略541字，正式會(huì)員可完整閱讀）……　   更多相關(guān)文章：β-甘露聚糖酶產(chǎn)生菌的篩選和 ，酵母膏0.5，蛋白胨0.3，nano3 0.3，mgso4·7h2o 0.5，kcl 0.5，k2hpo4 0.1，feso4·7h2o 0.001，ph6.0； 　　產(chǎn)酶培養(yǎng)基（%）：魔芋精粉1.0，nano3 0.3，mgso4·7h2o 0.5，kcl 0.5，k2hpo4 0.1，feso4·7h2o 0.001，ph6.0。 　　1.4 菌株的分離和篩選 　　稱取1 g土壤于試管中，加入l0ml蒸餾水，振蕩混勻，取l ml接種到富集培養(yǎng)基中，37℃，160 rpm培養(yǎng)24 h。選擇培養(yǎng)液粘度明顯下降的菌液，用無(wú)菌水梯度稀釋后涂布于固體分離培養(yǎng)基中，置 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，用剛果紅染色，觀察菌落周?chē)�有無(wú)透明圈，挑取透明圈大的單菌落進(jìn)行劃線純化。經(jīng)純化后的菌株在發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)24 h，測(cè)定培養(yǎng)液中β-甘露聚糖酶的活力，篩選出酶活力高的菌株。 　　1.5 β-甘露聚糖酶粗酶液的制備 　　將菌株接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)24 h，按l %比例接入產(chǎn)酶培養(yǎng)基中，37℃，160 rpm培養(yǎng)24 h。發(fā)酵液離心所得上清液即為粗酶液。 　　1.2.4 β-甘露聚糖酶酶活力的測(cè)定 　　酶活力的測(cè)定：取0.4 ml 0.5%(w/v)葡甘露聚糖 (用ph7.0，0.01 mol/l 磷酸鈉緩沖液配制)，加入0.1 ml 適當(dāng)濃度的酶液，37℃水浴反應(yīng)15 min，用dns法測(cè)定所產(chǎn)生的還原糖[7]。 　　酶活力單位定義：在上述反應(yīng)條件下，每分鐘由底物釋放出相當(dāng)于1µmold-甘露糖的還原糖所需酶量為1個(gè)酶活力單位(u)。 　　2 結(jié)果 　　2.1 菌株篩選 　　從土樣中篩選出5株產(chǎn)β-甘露聚糖酶的高產(chǎn)菌株（編號(hào)為dk1~5）,其中dk3菌株的搖瓶培養(yǎng)液的粘度下降快，菌落周?chē)�有大的透明圈，搖瓶培養(yǎng)液中的β-甘露聚糖酶活力達(dá)3.85 u /ml （表1）。 　　表1 菌株篩選結(jié)果 　　菌株編號(hào) 　　β-甘露聚糖酶活力（u / ml） 　　dk1 　　dk2 　　dk3 　　dk4 　　dk5 　　2.21 　　2.42 　　3.85 　　3.30 　　3.00 　　2.2 酶學(xué)性質(zhì)的研究 　　2.2.1 溫度對(duì)酶活力的影響：在30~70℃下測(cè)定β-甘露聚糖酶的活性，結(jié)果表明，該酶分解葡甘露聚糖的最適溫度為37℃，在30~45℃都具有較高的活力（圖1）。 　　圖1 β-甘露聚糖酶促反應(yīng)最適溫度 　　2.2.2 溫度對(duì)酶穩(wěn)定性的影響：將酶液分別置于40、50、60 ……（未完，全文共2338字，當(dāng)前只顯示1407字，請(qǐng)閱讀下面提示信息。收藏β-甘露聚糖酶產(chǎn)生菌的篩選和酶學(xué)性質(zhì)探討） 上一篇：asp.net 2.0下客戶端腳本調(diào)用服務(wù)端函數(shù)的分析 下一篇：淺論當(dāng)前校園_全問(wèn)題 相關(guān)欄目：綜合論文