標(biāo)題:論植物組織培養(yǎng)褐變產(chǎn)生的因素及對(duì)策

  摘 要:本文針對(duì)植物組織培養(yǎng)中常見的褐變現(xiàn)象,詳細(xì)地分析了其產(chǎn)生的機(jī)理及影響因素,并提出了相應(yīng)的對(duì)策,為科研和生產(chǎn)提供了一定的理論和實(shí)踐依據(jù)。
  關(guān)鍵詞:植物組織培養(yǎng),褐變,對(duì)策
  目前,在許多植物組織培養(yǎng)過程中,常遇到褐變問題。褐變主要發(fā)生在外植體,在植物愈傷組織的繼代、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)以及原生質(zhì)體的分離與培養(yǎng)中也經(jīng)常發(fā)生。褐變產(chǎn)物不僅使外植體、細(xì)胞、培養(yǎng)基等變褐,而且對(duì)許多酶有抑制作用,從而影響培養(yǎng)材料的生長(zhǎng)與分化,嚴(yán)重時(shí)甚至導(dǎo)致死亡。本文探討植物組織培養(yǎng)中褐變現(xiàn)象的影響 ……(快文網(wǎng)http://hoachina.com省略412字,正式會(huì)員可完整閱讀)…… 
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細(xì)胞的程序化死亡,溫度是誘導(dǎo)程序化死亡的主要因素[1]。
  2 褐變產(chǎn)生的機(jī)理
  2.1 非酶促褐變
  非酶促褐變是由于細(xì)胞受脅迫或其他不利條件影響所造成的細(xì)胞程序化死亡或自然發(fā)生的細(xì)胞死亡,即壞死形成的褐變現(xiàn)象,并不涉及酚類物質(zhì)的產(chǎn)生。徐振彪等[1]將生長(zhǎng)正常的愈傷組織轉(zhuǎn)移到含nacl的培養(yǎng)基中,組織周圍尤其是接觸培養(yǎng)基部分發(fā)生褐變,但培養(yǎng)基中沒有看到擴(kuò)散的褐化物質(zhì)。當(dāng)溫度升高時(shí)繼代保存時(shí)間過長(zhǎng),也會(huì)發(fā)生此類現(xiàn)象。但這種褐變?nèi)舨扇∵m當(dāng)措施或者愈傷組織適應(yīng)了脅迫環(huán)境就不再發(fā)生了[3]。
  2.2 酶促褐變
  目前認(rèn)為植物組織培養(yǎng)中的褐變主要是由酶促褐變引起的,培養(yǎng)材料變褐主要是由傷口處分泌的酚類化合物引起的[4]。酶促褐變?nèi)缤话愕拿复俜磻?yīng),其發(fā)生必須具備三個(gè)條件,即酶、底物和氧。引起褐變的酶有多酚氧化酶(ppo)、過氧化物酶(pod)、苯丙氨酸解氨酶等。從初次培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)過程中試管苗的褐變程度和ppo的活性來看,表明ppo活性的高低是引起培養(yǎng)材料褐變的關(guān)鍵。引起褐變的酶的底物主要是酚類化合物,按其組成可分成3類:苯基羧酸(包括鄰羥基苯酚、兒茶酚、沒食子酸、莽草酸等),苯丙烷衍生物(包括綠原酸、肉桂酸、香豆酸、咖啡酸、單寧、木質(zhì)素等),第三類是黃烷衍生物(包括花青素、黃酮、蕓香苷等),但并非所有的酚類物質(zhì)都是ppo的底物。
  在正常發(fā)育的植物組織中,底物、氧氣、ppo同時(shí)存在并不發(fā)生褐變,是因?yàn)樵谡5慕M織細(xì)胞內(nèi)由于多酚類物質(zhì)分布在細(xì)胞的液泡內(nèi),而ppo則分布在各種質(zhì)體或細(xì)胞質(zhì)中,這種區(qū)域性分布使底物與ppo不能接觸。而當(dāng)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)發(fā)生變化和破壞時(shí),則為酶創(chuàng)造了與ppo接觸的條件,在氧存在的情況下使酚類物質(zhì)氧化成醌,進(jìn)行一系列的脫水、聚合反應(yīng),最后形成黑褐色物質(zhì),從而引起褐變。
  3 防止外植體產(chǎn)生褐變的對(duì)策
  從理論上講,酶促褐變可以通過以下三種方法加以抑制:一是除去引起氧化的物質(zhì) ……(未完,全文共4447字,當(dāng)前只顯示1070字,請(qǐng)閱讀下面提示信息。收藏論植物組織培養(yǎng)褐變產(chǎn)生的因素及對(duì)策

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