| 標(biāo)題：談產(chǎn)有機(jī)磷農(nóng)藥降解酶菌株的篩選及酶學(xué)性質(zhì)研究 | ||
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摘要通過用乙酰膽堿酯酶抑制法檢測有機(jī)磷農(nóng)藥，從土壤中分離篩選出能降解敵敵畏的7個(gè)菌株，從其中降解能力較強(qiáng)的菌株opd7提取胞內(nèi)酶，并進(jìn)行酶學(xué)性質(zhì)的研究。結(jié)果表明，該酶分解敵敵畏的最適ph為7.0，最適溫度為42℃，ph穩(wěn)定范圍為6-8，在低于47℃時(shí)穩(wěn)定；該酶也能降解乙酰甲胺磷、甲胺磷、樂果和氧化樂果。 關(guān)鍵詞敵敵畏有機(jī)磷農(nóng)藥降解酶 酶學(xué)性質(zhì) 有機(jī)磷農(nóng)藥(organophosphates，簡稱ops)具有殺蟲效 ……（快文網(wǎng)http://hoachina.com省略364字，正式會員可完整閱讀）……
1．材料與方法 1.1 土壤的來源 土壤取自農(nóng)藥廠的排污水溝和附近的農(nóng)田。 1.2 乙酰膽堿酯酶從家蠅頭部提取。 1.3 培養(yǎng)基 富集培養(yǎng)基(%)：nano3 2，kcl 0.5,cacl2 0.05 ，kh2po4 1，mgso4.7h2o 0.5，ph7.0,使用前加入適量敵敵畏濃縮液。 分離培養(yǎng)基(%)：kh2po4 0.5，(nh4)so4 0.5，feso4 o.001g，k2hpo40.2， cac120.005 ,mgso4.7h2o 0.2，使用前加入適量敵敵畏濃縮液。 發(fā)酵培養(yǎng)基(%)：蛋白胨1.0，酵母粉0.5，nacl 1.0， ph7.0。 1.4菌株的富集、馴化和篩選 取2 g土樣于100m1富集培養(yǎng)基中，加敵敵畏至100 mg/l， 37℃振蕩培養(yǎng)24 h，所得菌液接入新的富集培養(yǎng)基中（接種量10%），并提高敵敵畏濃度到200 mg/l，24h后接入新的富集培養(yǎng)基中，敵敵畏終濃度提高至300 m g/l，如此循環(huán)至培養(yǎng)液中敵敵畏濃度達(dá)到500m g/l。然后，將培養(yǎng)液接入分離培養(yǎng)基（敵敵畏濃度為500mg/l）繼續(xù)培養(yǎng)，一周后再移種一次。將富集所得菌液適當(dāng)稀釋，涂布于分離平板，觀察是否有菌落生長，選擇生長旺盛的菌落進(jìn)行純化。 1.5 敵敵畏降解酶粗酶液的提取 用發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)菌體，離心收集菌體，用0.02mol/l, ph7.0的磷酸緩沖液洗滌后再離心，用適量磷酸緩沖液懸浮所得菌體，用jy92-ii型超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)破碎細(xì)胞（工作電壓 ……（未完，全文共3928字，當(dāng)前只顯示945字，請閱讀下面提示信息。收藏談產(chǎn)有機(jī)磷農(nóng)藥降解酶菌株的篩選及酶學(xué)性質(zhì)研究） 上一篇：初中學(xué)校書記崗位職責(zé) 下一篇：淺析甘露醇/山梨醇共結(jié)晶體性質(zhì)及在魚糜中的應(yīng)用優(yōu)勢 相關(guān)欄目：大學(xué)生 調(diào)研報(bào)告 綜合論文 |