標(biāo)題:論山楂葉粗品多糖的分級純化及純度測定

  摘要:將山楂葉中的水溶性多糖成分提取出來,然后通過sevage法來除去其中的蛋白質(zhì),用透析法來除去低分子量物質(zhì),再通過離子交換柱和凝膠柱洗脫來進(jìn)行進(jìn)一步的分離純化。通過電泳、凝膠柱層析和高效液相凝膠色譜法來測定多糖精品的純度,證明其純度很高。
  關(guān)鍵詞:山楂葉 粗品多糖 純化 純度 測定
  一、對山楂葉粗品多糖的分級純化
  (一)材料與方法
  在這里,我們是用過離子交換柱和凝膠柱來達(dá)到純化多糖樣品的目的。采用的 ……(快文網(wǎng)http://hoachina.com省略367字,正式會員可完整閱讀)…… 
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實(shí)驗(yàn)方法
  2.1過cm-纖維素離子交換柱
  先將cm-纖維素填料裝入玻璃柱(規(guī)格為ф2×23cm )中,以5mm 的naac洗脫液將兩個(gè)液相泵(a泵和b泵)與柱聯(lián)接成一真空系統(tǒng),以0.5ml/min的流速平衡一天,之后即可上樣,采用梯度洗脫,母液為5mm 的naac溶液,梯度液為1n 的nacl溶液(從0.2n~0.8n),上樣量為5ml(濃度0.1g/ml),流速0.5ml/min,隔15min收集一管,從第20管開始進(jìn)行梯度洗脫。每隔兩管用蒽酮-硫酸法監(jiān)測[以管號為橫坐標(biāo),620nm處紫外吸收值(od值)為縱坐標(biāo)作圖],分別按相關(guān)峰位收集并凍干。之后取主要產(chǎn)物過sephadexg-100柱進(jìn)行進(jìn)一步的分離。
  2.2 過sephadexg-100凝膠柱
  將sephadexg-100凝膠填料裝柱(規(guī)格為ф2×85cm),再通過0.1nnacl洗脫液把a(bǔ)泵與柱連接起來,以0.3ml/min流速平衡一天,之后即可上樣,上樣量為5ml(濃度0.1g/ml),用0.1nnacl緩沖溶液以0.3ml/min流速洗脫,隔15min收集一管。以蒽酮-硫酸法監(jiān)測,分別按相關(guān)峰位收集并凍干。
 。ǘ┙Y(jié)果與分析
  1.過cm-纖維素離子交換柱結(jié)果
  山楂葉粗品多糖ks經(jīng)過cm-纖維素柱梯度洗脫,分別按相關(guān)峰位收集并凍干之后,得到四個(gè)組分:ks1、ks2、ks3、ks4(如圖2)。其中,ks1占14%,ks2占25%,ks3占52%,ks4占9%,均為白色絮狀物。這里,ks3是主要組分。
  2.過sephadexg-100凝膠柱洗脫結(jié)果
  當(dāng)ks3經(jīng)過sephadexg-100柱洗脫,按相關(guān)峰位收集并凍干之后,可分成兩個(gè) ……(未完,全文共3961字,當(dāng)前只顯示953字,請閱讀下面提示信息。收藏論山楂葉粗品多糖的分級純化及純度測定

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