標題：論鴨疫里氏桿菌油乳劑滅活苗的創(chuàng)新研制

　　鴨疫里氏桿菌�。ㄓ址Q鴨傳染性漿膜炎、鴨疫巴氏桿菌病）是雛鴨一種常見的急性敗血性傳染病。預防控制該病的方法是藥物防治和菌苗接種，我們以本地分離株制備種子液，再將種子液接種鴨胚增殖培養(yǎng)，收獲菌液經(jīng)甲醛滅活后制備成油乳劑滅活菌苗，進行免疫攻毒試驗，保護率為75.0%。在部分鴨場使用該菌苗，結(jié)果證明安全有效。
　　1 材料與方法
　　1.1 材料
　　1.1.1 菌種。制備菌苗的菌株分離自湖北黃梅縣某鴨場，經(jīng)鑒定后凍干保存。
　　1.1.2 鴨胚。由湖北神丹健康食品有限公司提供，自行孵化。
　　1.1.3 試驗鴨。10日齡公雛鴨，購自某種鴨場，籠養(yǎng)　……（快文網(wǎng)http://hoachina.com省略473字，正式會員可完整閱讀）……　
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鈉，在1000r/min轉(zhuǎn)速下攪拌30min，使水油充分乳化，制成油包水型油乳劑。
　　1.3 菌苗無菌檢查。將制備好的滅活油乳苗分別接種于普通肉湯培養(yǎng)基和血瓊脂培養(yǎng)基中，37℃溫箱中培養(yǎng)72ｈ，觀察有無細菌生長。
　　1.4 菌苗安全性檢查。取10日齡健康公雛鴨5只，頸部皮下注射菌苗，1ml/只，觀察10天。
　　1.5 菌苗物理性狀檢查。用吸管吸取1ｍl保持垂直狀態(tài)，記錄放出0.4ml所需時間；觀察菌苗滴于水中是否呈油滴狀并且不分散；油乳劑滅活苗在3000r/min轉(zhuǎn)速下離心15min后是否出現(xiàn)分層、破乳現(xiàn)象。
　　1.6 攻毒保護試驗。將40只健康的10日齡公雛鴨隨機分為2組，每組20只。試驗組每只注射菌苗0.5ml，對照組不免疫。在免疫后第7天進行攻毒試驗，每鴨皮下注射40億個菌的種子液。攻毒后觀察鴨的發(fā)病及死亡情況，并對攻毒鴨進行剖檢觀察。
　　1.7 田間試驗。取該菌苗在湖北黃梅縣部分養(yǎng)鴨場進行免疫試驗，共免疫8~16日齡雛鴨3100多只，每只皮下注射0.5ml，定期跟蹤觀察。
　　2 結(jié)果
　　2.1 安全性檢查。5只雛鴨觀察10天全部健活，精神正常，食欲良好。
　　2.2 菌苗的物理性狀。所制菌苗為白色均質(zhì)乳劑，粘度為5.8ｓ，菌苗滴于水中呈圓的油滴狀不分散，因此為油包水型，離心未出現(xiàn)分層、破乳現(xiàn)象。
　　2.3 攻毒保護試驗。免疫組在10日齡免疫，17日齡攻毒，20只鴨，有15只建活，3只死亡，2只感染，保護率可達75.0%。對照組20只鴨全部死亡，將對照組病死鴨進行剖檢，可見心臟、肝臟表面有一層白色的纖維素性包膜，心肌、心冠脂肪有出血，肝臟腫大出血，心包腔內(nèi)填滿淡黃色纖維素性滲出物等現(xiàn)象。
　　2.4 田間試驗。在湖北黃梅縣部分養(yǎng)鴨場使用菌苗接種后，雛鴨成活率比往年明顯上升，產(chǎn)蛋鴨死淘率下降。
　　3 小結(jié)與討論
　　3.1 從上面試驗結(jié)果可知，從當?shù)伉唸龇蛛x的菌株具有良好的免疫原性，采用上述方法制備的鴨疫里氏桿菌油佐劑滅活苗是安全有效的。
　　3.2 本次攻毒試驗保護率為75.0%，若在制苗過程中加大菌苗中菌數(shù)含量或者選擇增加適當免疫增強劑，則保護率還可以提高，這有待以后繼續(xù)研究。據(jù)相關(guān)資料報道，鴨胚培養(yǎng)制備的 ……（未完，全文共2041字，當前只顯示1228字，請閱讀下面提示信息。收藏論鴨疫里氏桿菌油乳劑滅活苗的創(chuàng)新研制）

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